AF430 OVA，Alexa Fluor430 Ovalbumin 应用于细胞生物学和免疫学研究

更新时间：2026-03-09 12:48:49一点通 - fjmyhfvclm

一、物化性质

保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融

英文名称： AF430 OVA，AF430 Ovalbumin，Alexa Fluor430 OVA，Alexa Fluor430 Ovalbumin，Ovalbumin,Alexa Fluor 430 labeled，Ovalbumin,AF430 labeled

中文名称： AF430标记鸡卵白蛋白

规格标准：该试剂的纯度通常达到95%以上，规格包括1mg、5mg、10mg等，也可按需包装。

生产信息：新研博美生物

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二、功能结构与组成

AF430标记鸡卵白蛋白（AF430 OVA）是一种将高性能荧光染料Alexa Fluor 430（AF430）共价偶联到鸡卵白蛋白（Ovalbumin, OVA）上形成的荧光示踪探针。它兼具OVA的免疫原性和AF430的高亮度荧光特性，广泛应用于细胞生物学和免疫学研究中。

化学本质：AF430 OVA是Alexa Fluor 430荧光染料与鸡卵白蛋白通过酰胺键（或其他稳定共价键）连接的复合物。

核心功能：作为模型抗原或示踪剂，用于研究细胞的吞噬作用（Phagocytosis）、抗原呈递过程以及蛋白质在细胞内的转运路径。

物理性质：通常为冻干粉末或溶液。OVA分子量约为45 kDa，AF430染料赋予其绿色荧光信号（激发/发射波长约为430/540 nm）。

结构特点

该标记物的结构设计体现了“载体+信号”的模块化特点：

蛋白载体（OVA）：

来源与结构：OVA是鸡蛋清中的主要蛋白质，含有丰富的赖氨酸残基（氨基），为染料标记提供了丰富的反应位点。

特点：OVA是一种经典的T细胞依赖性抗原，具有明确的抗原表位，能够有效激活免疫系统，是研究免疫应答的理想模型。

荧光基团（AF430）：

化学本质：AF430是一种磺化修饰的香豆素衍生物，属于Alexa Fluor系列染料。

光学特性：激发波长约430 nm（蓝紫光），发射波长约540 nm（绿色荧光）。它具有较大的斯托克斯位移（约105 nm），这意味着激发光和发射光重叠少，背景干扰低，信噪比高。

稳定性：相较于传统的绿色染料（如FITC），AF430具有更高的光稳定性和pH稳定性（pH 4-10），不易发生光漂白，适合长时间活细胞成像。

三、AF430 OVA 用于细胞成像与追踪的原理、应用特点

工作原理

荧光标记原理：AF430 是一种磺酰基修饰的香豆素类荧光染料，其活性酯基团（如 NHS 酯）可与蛋白质表面的伯胺基团（主要是赖氨酸残基）发生酰胺化反应，形成稳定的共价键。OVA 作为标记底物，其表面富含伯胺，因此可通过此反应实现定点、高效的标记。

光学特性：AF430 的最大激发波长约为 430 nm，最大发射波长约为 542 nm（绿黄光范围）。它具有高亮度、高光稳定性、pH 不敏感性（在 pH 4–10 范围内稳定）以及大的斯托克斯位移（约 112 nm）。这些特性使其在荧光成像中能提供强且稳定的信号，并易于与其他荧光染料区分，适用于多色成像。

细胞成像与追踪机制：标记后的 AF430-OVA 复合物可通过多种方式引入细胞（如内吞、显微注射、电转等）。进入细胞后，在 405 nm 或 445 nm 激光（常见于共聚焦显微镜🔬）激发下，AF430 发出荧光。通过实时或定时拍摄，研究人员可可视化并量化 OVA 在细胞内的定位（如内吞体、溶酶体）、运动轨迹及代谢命运。

应用特点

高灵敏度与低背景：AF430 的荧光量子产率高，光稳定性强，能在长时间成像中抵抗光漂白，从而提供持续、清晰的信号，并有效降低背景噪声。

优异的生物相容性：OVA 是一种惰性、生物相容性好的模型蛋白，其标记过程通常不会显著改变其物理化学性质，且 AF430 染料本身亲水性强，对细胞毒性低，适合活细胞成像。

多通道兼容性：AF430 的激发与发射光谱与其他常用荧光染料（如 FITC、TRITC、Cy5）重叠较少，便于进行多色标记实验，同时观察多个靶点或过程。

适用于多种成像平台：AF430 可被标准的紫外/蓝光激光器（如 405 nm、445 nm）激发，兼容宽场、共聚焦、STED 超分辨显微镜🔬以及流式细胞仪等多种检测平台。

信号可定量：荧光强度与 AF430-OVA 的浓度在一定范围内呈线性关系，因此可用于定量分析细胞内蛋白的摄取量、分布密度及动态变化。

应用场景广泛：

内吞与胞内运输研究：追踪模型抗原（OVA）被抗原呈递细胞（如树突状细胞、巨噬细胞）摄取、加工及呈递的路径。

蛋白定位与周转：作为惰性报告分子，研究蛋白质在细胞器间的转运及降解动力学。

免疫学研究：作为荧光标记的抗原，用于可视化免疫细胞对抗原的捕获、处理及呈递过程。

药物递送研究：作为模型蛋白，偶联于纳米颗粒表面，用于评估递送系统的细胞内吞效率及胞内命

四、关联试剂